盈众彩票

TG16-WS  TDZ5-WS  湘仪离心机 H1850R
当前位置:首页 > 湖南湘仪介绍细胞涂片制备

湖南湘仪介绍细胞涂片制备

[导读]介绍细胞涂片制备与染色收集细胞的方法,所需仪器为湖南湘仪细胞涂片离心机和酶标转子离心机。


1、 方法:细胞培养细胞株Jurkat培养于含10%小牛血清的RPMI1640(加100U/mL青霉素、100U/mL链霉素)细胞培养基中,换液培养瓶中约一半液体传代,加入相近量的细胞培养基,置于细胞培养箱中,待细胞培养室呈对数生长时备用。

2、细胞涂片制备与染色收集上述细胞,设置湖南湘仪离心机TDZ5-WS转速800r/min,离心5min,去上清液,加入PBS洗涤1次,然后调整细胞浓度为1×106mL, 分别取等量的细胞进行3种方法制片。直接涂片法,取20μL细胞悬液均匀涂布载玻片,然后置于室温干燥;细胞涂片离心机法取等量的细胞,然后加200μL的PBS稀释, 安装好载玻片加样设置离心机转速为500r/min离心3min;湖南湘仪酶标板转子低速离心机法,先用透明胶带固定载玻片上下端在酶标板上, 然后取20μL细胞悬液均匀涂布载玻片, 立即置于湖南湘仪TDZ5-WS酶标板转子上500r/min离心3min。离心后取出载玻片置于室温干燥,均加数滴甲醇固定,任其挥发干燥,然后瑞氏-姬姆萨染色,干燥后显微镜下观察,CCD拍照。

3、现有的细胞涂片技术, 较简单的方法是直接涂布于载玻片上, 复杂方法需使用湖南湘仪专用的细胞涂片离心机,首先将载玻片置于该设备玻片匣里,垫一张自制带孔载玻片大小的滤纸, 扣牢放入离心机转盘中,将处理好的细胞加入进样孔,以一定速度离心,取出载玻片,最后清洗设备玻片匣备用。

因此直接涂片细胞变小,而细胞内物质积聚,因此染色时与染料在单位体积内结合更多而着色深沉。酶标板转子低速离心机法与细胞涂片离心机原理一样,所以效果相同。并且此法仅仅是将载玻片用透明胶带固定在酶标板上, 在原有的酶标板转子低速离心机中离心而已,离心机是生物学教学、科研领域中常见的仪器,并没有增加设备和耗材。而且整个过程不需要太多的前期准备工作和后期的清洗负担,也可用于其他来源的组织体液样本,尤其适合高校教学,培养大学生实践创新能力。此方法要求操作迅速, 不同样本的离心速度和时间也不尽相同。

以上介绍仅供参考。


相关文章